一、采样点的位置及数量
测定洁净度的每次最小采样量；每个洁净区最少采样次数为3次，当洁净区仅有一个采样点时，则在该点至少采样3次；对预期空气洁净度等级达到4级或更洁净的环境采样量很大可采用ISO14644-1附录F规定的顺序采样法。
二、技术要求
每个采样点的平均粒子浓度Ci应小于或等于洁净度等级规定的限值；全部采样点的平均粒子浓度N的95%置信上限值应小于或等于洁净等级规定的限值。
三、操作过程及判定
1、仪器开机后预热至稳定后，方可按照使用说明书的规定对仪器进行校正，自检、自校、零计数。
2、采样管口置采样点采样时在确认计数稳定后方可开始连续读数。
3、计数器采样口和仪器的工作位置应处在同一气压和温度下，以免产生测量误差。
4、对于单向流洁净室采样口应对着气流方向对于乱流洁净室采样口宜向上采样速度均应尽可能接近室内气流速度。
5、记录数据评价。
四、洁净室空气中悬浮粒子检测采样时应注意的问题
1、静态测试时室内的测试人员不得多于2人测试报告中应标明测试时所采用的状态。
2、对于单向流测试应在净化空气调节系统正常运行时间不少于10min后开始非单向流要不少于30min后开始。
3、必须按照仪器的检定周期定期对仪器作检定。视仪器本身特点、使用频率、使用环境等决定。
4、每个采样点可按所计算确定的最小采样量采样空气。但一般根据所使用的粒子计数器的采样量及时间设定通常实际采样都可能高于最小采样量。
5、测定时，进入洁净室的人员要穿洁净服有风淋室要经过风淋室，在室内尽量处于下风处并静止少动。
6、室内浮游菌和沉降菌空气中悬浮微生物的测定有多种，但其测定的基本过程都是经过捕集、培养、计数的过程，目前采用的是浮游菌和沉降菌的测试方法。
6.1、仪器设备及环境测量仪器培养皿、离心式微生物采样器、恒温培养箱，浮游菌、沉降菌测试前，被测试洁净室区的温湿度须达到规定的要求，静压差必须控制在规定值内，被测试洁净室区已消毒。
采样装置采样前的准备及采样后的处理均应在高效过滤器排风的负压实验室进行操作，测试状态有静态和动态两种并在报告中注明测试状态。测试人员测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。 静态测试时室内测试人员不得多于2个人。
6.2、采样点的位置及数量室内浮游菌测点和洁净度测点可相同，采样必须按所用仪器说明书说明的步骤进行，特别要注意检测之前对仪器消毒灭菌。沉降菌测定时，培养皿应布置在有代表性的地点和气流扰动极小的地点培养皿数。
6.4、操作过程及判断
6.4.1、浮游菌的测试
首先应对测试仪器、培养皿表面进行严格消毒，采样器进入被测房间时，先用消毒房间的消毒剂灭菌。用于5级洁净房间的采样器宜一直放在洁净房间。采样者应穿戴洁净服双手要消毒。开动真空泵抽气使仪器中的残余消毒剂蒸发时间不少于5min，并调好流量转盘转速。关闭真空泵放入培养皿盖好盖子后调节采样器。置采样口于采样点后依次开启采样器、真空泵、转动定时器、根据采样量选定采样时间。全部采样结束后，将培养皿倒置于30-35℃恒温培养箱中，培养时间不少于48h。用肉眼直接计数，然后用5-10倍放大镜检查是否有遗漏，若平板上有两个或两个以上的菌落重叠分辨时，仍以两个或两个以上菌落计数。
6.4.2、沉降菌的测试
对单向流如5级净化房间内及层流工作台测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后开始；对非单向流如7级、8级以上的净化房间测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟开始。
采样方法：将已制备好的培养皿放置在预先确定的取样点，打开培养皿盖使培养基表面暴露0.5小时再将培养皿盖上盖后倒置。培养全部采样结束，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。在30-35℃培养时间不少于48小时。每批培养基应有对照试验检查培养基本身是否污染可每批选定3只培养皿作对照培养。菌落计数用肉眼直接计数然后用5-10倍放大镜检查有否遗漏。若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。
五、注意事项
测试用具要做灭菌处理以确保测试的可靠性、正确性。采取一切措施防止人为对样本的污染。对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面，仔细观察不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。采样前应仔细检查每个培养皿的质量如发现变质、破损或污染的应剔除。
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